Residual concentrations of antimicrobial growth promoters in poultry litter favour plasmid conjugation among Escherichia coli.

Considering that plasmid conjugation is a major driver for the dissemination of antimicrobial resistance in bacteria, this study aimed to investigate the effects of residual concentrations of antimicrobial growth promoters (AGPs) in poultry litter on the frequencies of IncFII-FIB plasmid conjugation among Escherichia coli organisms. A 2 × 5 factorial trial was performed in vitro, using two types of litter materials (sugarcane bagasse and wood shavings) and five treatments of litter: non-treated (CON), herbal alkaloid sanguinarine (SANG), AGPs monensin (MON), lincomycin (LCM) and virginiamycin (VIR). E. coli H2332 and E. coli J62 were used as donor and recipient strains, respectively. The presence of residues of monensin, lincomycin and virginiamycin increased the frequency of plasmid conjugation among E. coli in both types of litter materials. On the contrary, sanguinarine significantly reduced the frequency of conjugation among E. coli in sugarcane bagasse litter. The conjugation frequencies were significantly higher in wood shavings compared with sugarcane bagasse only in the presence of AGPs. Considering that the presence of AGPs in the litter can increase the conjugation of IncFII-FIB plasmids carrying antimicrobial resistance genes, the real impact of this phenomenon on the dissemination of antimicrobial resistant bacteria in the poultry production chain must be investigated.

Deciphering the role of ttrA and pduA genes for Salmonella enterica serovars in a chicken infection model.

Salmonella enterica serovars use self-induced intestinal inflammation to increase electron acceptor availability and to obtain a growth advantage in the host gut. There is evidence suggesting that the ability of Salmonella to use tetrathionate and 1,2-propanediol provides an advantage in murine infection. Thus, we present here the first study to evaluate both systemic infection and faecal excretion in commercial poultry challenged by Salmonella Enteritidis (SE) and S. Typhimurium (STM) harbouring deletions in ttrA and pduA genes, which are crucial to the metabolism of tetrathionate and 1,2-propanediol, respectively. Mutant strains were excreted at higher rates when compared to the wild-type strains. The highest rates were observed with white egg-layer and brown egg-layer chicks (67.5%), and broiler chicks (56.7%) challenged by SEΔttrAΔpduA, and brown egg-layer chicks (64.8%) challenged by STMΔttrAΔpduA. SEΔttrAΔpduA presented higher bacterial counts in the liver and spleen of the three chicken lineages and caecal contents from the broiler chickens, whereas STMΔttrAΔpduA presented higher counts in the liver and spleen of the broiler and brown-egg chickens for 28 days post-infection (P < 0.05). The ttrA and pduA genes do not appear to be major virulence determinants in faecal excretion or invasiveness for SE and STM in chickens. RESEARCH HIGHLIGHTSttrA and pudA do not impair gut colonization or systemic infection in chicks.Mutant strains were present in higher numbers in broilers than in laying chicks.Mutants of SE and STM showed greater pathogenicity in broiler chicks than layers.

Evaluation of propanediol and cobalamin metabolism in the intestinal colonization and systemic invasion of Salmonella Enteritidis in laying hens / [Avaliação do metabolismo do propanodiol e da cobalamina na colonização intestinal e na infecção sistêmica de Salmonella Enteritidis em poedeiras]

Embora Salmonella Enteritidis (SE) seja capaz de metabolizar 1,2-propanodiol (1,2-Pd), utilizado como fonte de carbono e de energia ao longo de uma rota dependente de vitamina B12, a importância deste composto na infeção de Gallus gallus domesticus por SE permanece desconhecida. No presente estudo, foram construídos um mutante de SE sem os genes pduCDE, que codifica a propanodiol desidratase (Pdu), e outro contendo as deleções no pduCDE e também nos genes cobS e cbiA, responsáveis pela síntese de vitamina B12. Em seguida, avaliou-se a importância do metabolismo do 1,2-Pd em SE para colonização intestinal de infecção sistêmica de poedeiras comerciais. As estirpes mutantes de SE foram capazes de colonizar o intestino, de serem excretadas nas fezes e de invadir o baço e o fígado na mesma intensidade que a estirpe selvagem, o que sugere que os produtos dos genes pduC, pduD, pduE, cobS e cbiA não são essenciais durante infecção por Salmonella Enteritidis nessa espécie.(AU)

Assessment of Newcastle and infectious bronchitis pathogens, and Salmonella spp. in wild birds captured near poultry facilities / Pesquisa de Salmonella spp., de doença de Newcastle e de bronquite infecciosa em aves silvestres capturadas próximo a instalações avícolas

Aves de vida livre podem ser carreadoras e disseminadoras de agentes patogênicos e representarem um risco para galinhas de produção. O objetivo deste trabalho foi verificar em aves de vida livre a presença de anticorpo contra: Salmonella Pullorum (SP), vírus da doença de Newcastle (VDN) e vírus da bronquite infecciosa (VBI), bem como a presença de Salmonella spp. De 48 aves de vida livre capturadas nas imediações de uma granja avícola, no norte do Estado de São Paulo, em 2005 e 2006, foram colhidos soros para realização de testes de soroaglutinação rápida em placa (SAR) para SP, inibição de hemaglutinação (HI) para o VDN e soroneutralização (SN) para VBI. Foram colhidos fragmentos de fígado, baço e ovários/testículos, todos cultivados juntos como um pool e conteúdo intestinal separado, para cultura de Salmonella spp. Todas as amostras foram negativas para a doença de Newcastle e bronquite infecciosa. Quanto à Salmonella Pullorum, pela técnica de SAR, a amostra de Theristicus caudatus foi positiva. No exame bacteriológico, foi isolado o agente em três aves: Theristicus caudatus (Salmonella Muenchen), Zenaida auriculata (Salmonella Enteritidis) e em Cariama cristata tanto Salmonella Muenchen como Salmonella Saintpaul.

The contribution of genes required for anaerobic respiration to the virulence of Salmonella enterica serovar Gallinarum for chickens

Salmonella enterica serovar Gallinarum (SG) is an intracellular pathogen of chickens. To survive, to invade and to multiply in the intestinal tract and intracellularly it depends on its ability to produce energy in anaerobic conditions. The fumarate reductase (frdABCD), dimethyl sulfoxide (DMSO)-trimethylamine N-oxide (TMAO) reductase (dmsABC), and nitrate reductase (narGHIJ) operons in Salmonella Typhimurium (STM) encode enzymes involved in anaerobic respiration to the electron acceptors fumarate, DMSO, TMAO, and nitrate, respectively. They are regulated in response to nitrate and oxygen availability and changes in cell growth rate. In this study mortality rates of chickens challenged with mutants of Salmonella Gallinarum, which were defective in utilising anaerobic electron acceptors, were assessed in comparison to group of bird challenged with wild strain. The greatest degree of attenuation was observed with mutations affecting nitrate reductase (napA, narG) with additional attenuations induced by a mutation affecting fumarate reductase (frdA) and a double mutant (dmsA torC) affecting DMSO and TMAO reductase.

Estudo experimental sobre a intoxicaçäo de Gallus gallus domesticus com sementes de Crotalaria spectabilis. II- Efeito em aves na fase final de crescimento / Poisoning of broilers by Crotalaria spectabilis. II- Experimental study on birds during the final phase of growth

Frangos de corte com linhagem comercial com idade de 28 dias foram tratados durante três semanas com raçäo acrescida de sementes trituradas de C. spectabilis em concentraçöes de 0,0 por cento (controle), 0,01 por cento, 0,1 por cento e 0,4 por cento. Aves alimentadas com raçäo com 0,4 por cento de sementes mostraram, a partir da segunda semana de tratamento experimental, penas eriçadas, apatia, caquexia, tristeza, abaulamento do abdômen e agrupamento. Na última semana houve morte de quatro animais. Ao final do período experimental constatou-se reduzido desenvolvimento, ascite pronunciada e lesöes principalmente de fígado, rim e pulmäo. A histopatologia mostrou graves lesöes hepáticas constituídas por necrose de hepatócitos, infiltrado celular inflamatório, hipertrofia e hiperplasia de células de ductos biliares, com atresia e colestase. Observou-se ainda pulmöes com grande número de nódulos ósseos e cartilaginosos, alteraçöes degenerativas tubulares de rim e necrose de células da bursa. De forma semelhante, todas as aves do grupo tratado com 0,1 por cento de sementes mostraram ascite. Foram freqüentes também as lesöes hepáticas, embora sempre leves. Os grupos tratados com 0,01 por cento de semente e controle näo apresentaram lesöes. Conclui-se que aves de linhagem comercial de corte, mesmo em fase final de crescimento, säo sensíveis à presença de C. spectabilis na raçäo. A ocorrência de ascite em todos os animais dos grupos tratados com 0,1 por cento e 0,4 por cento foi considerada importante, assim como a presença de maior número de nódulos ósseos e cartilaginosos pulmonares

Estudo experimental sobre a intoxicaçäo de Gallus gallus domesticus com sementes de Crotalaria spectabilis. I-Efeito em aves na fase incial de crescimento / Experimental study on the intoxication of Gallus gallus domesticus with Crotalaria spectabilis seeds. I-Effect in broiler during the initial fase of growing

A Crotalaria spectabilis é uma leguminosa amplamente distribuída no Brasil, que pode ser utilizada como adubaçäo verde. Suas sementes podem ser colhidas junto com o milho ou outros gräos quando invade plantaçöes de cereais. Tendo-se em vista que o milho é um componente essencial da raçäo de aves de exploraçäo comercial, representando aproximadamente 60 por cento da raçäo pronta, o presente estudo avaliou a açäo tóxica de sementes de Crotalaria spectabilis para aves de corte de linhagem comercial, durante os 28 primeiros dias de vida. Quatro grupos experimentais, subdivididos em grupos de machos e de fêmeas, foram tratados com raçäo inicial acrescida de sementes de Crotalaria spectabilis trituradas, nas proporçöes 0,0 (controle), 0,01 por cento, 0,1 por cento e 0,4 por cento. As dietas contendo 0,4 por cento e 0,1 por cento provocaram quadro de intoxicaçäo a partir do terceiro dia (0,4 por cento) ou da segunda semana (0,1 por cento) de vida, provocando sintomas tais como tristeza, apatia, aglomeraçäo, penas arrepiadas, acentuada anorexia e abdômen abaulado. Houve evidente retardo de crescimento e alta mortalidade. Múltiplas lesöes foram encontradas: ascite severa; degeneraçäo, necrose, apoptose e proliferaçäo conjuntiva hepáticas, com reduçäo do tamanho do órgäo; reduçäo de tecido linfóide da bursa, com presença de células picnóticas; lesöes degenerativas em rins; e calcificaçäo intersticial pulmonar, entre outras. As aves controle e aquelas que receberam 0,01 por cento de sementes näo apresentaram alteraçöes patológicas ou de desenvolvimento

Análises microbiológicas da cama de frango utilizada na alimentaçäo de ruminantes / Microbiological analyses of poultry litter used for ruminant feeding

O presente trabalho teve por objetivos avaliar a variaçäo da contagem total de bactérias em amostras de "cama" de frangos compostas por casca de arroz, após o armazenamento, assim como identificar aquelas bactérias potencialmente patogênicas presentes. Para as contagens foi utilizado o ágar para contagem padräo (Difco), os meios utilizados na identificaçäo foram ágar sangue, MacConkey, Baird-Parker, e para as anaeróbicas tubos com infusäo de cérebro e coraçäo, meio de carne cozida (Difco) e placas de ágar Clostrisel, BHI ágar e ágar gema de ovo, incubados em anerobiose com o sistema Gas-Pak (BBL). A metodologia para a identificaçäo bacteriana foi dirigida para a procura de Staphylococcus aureus, Salmonella sp, Clostridium perfringens, C. botulinum, C. chauvoei, Campylobacter sp, Escherichia coli, e Corynebacterium sp. Foram colhidas amostras da "cama" provenientes de galpöes de frangos de corte. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com quatro tratamentos e quatro repetiçöes, totalizando dezesseis amostras. Os resultados da avaliaçäo demonstraram haver decréscimo no número total de bactérias (NTB) quando se compararam os tratamentos T1(zero dias de estocagem) e T2 (14 dias de estocagem). Em contraposiçäo os tratamentos T3 (28 dias de estocagem) e T4 (42 dias de estocagem) apresentaram contagens de NTB significativamente superiores em relaçäo ao tratamento T1. Constatou-se a presença de bactérias patogênicas primárias ou secundárias da família das enterobactérias (Escherichia coli, Proteus, Arizona, Providencia, Edwardsiella), assim como Staphylococcus aureus, S. epidermidis, além de diversas espécies de Clostridium como C. perfringens, C. sordelli, C. chauvoei, C. tetani e C. novyi, e algumas cepas de Corynebacterium pyogenes. Entre toda a flora bacteriana determinada, o grupo das enterobactérias, demonstrou maior sensibilidade às modificaçöes do meio, em funçäo dos diversos tempos de estocagem testados

Interference between Salmonella serotypes in intestinal colonisation of chickens: correlation with in vitro behaviour.

The effect of colonisation of the alimentary tract of newly hatched chicks by different Salmonella serotypes on the establishment in the gut by other Salmonella strains inoculated afterwards was assessed. Although profound inhibition of colonisation had been found previously to be genus-specific, considerable variation was found within the Salmonella genus. Some strains were found to be much more inhibitory than others and some were more easily inhibited than were others. There was not an absolute relationship between inhibitory activity and colonisation ability. No relationship was seen between inhibition and serotype or phage types within serotypes. There was no correlation between in vivo inhibition and the extent of inhibition that occurred in early stationary phase cultures in rich, undefined broth cultures.